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1.
Rev. patol. trop ; 18(2): 173-81, dez. 1989. tab
Article in Portuguese | LILACS | ID: lil-151049

ABSTRACT

A superfície polissacarídica das espécies de Leishmanias pertecentes aos grupos mexicano, brasiliensis e estoques isolados no laboratório Gaspar Viana, foram estudadas através do teste de aglutinaçäo direta mediada por lectinas. Foram preparadas dez lectinas de sementes de leguminosas ( Lens culinaris, Ricinus communis, Artocarpus integrifolia, Persea americana, Arachis hypogaea, Magífera índica, Pisum sativum, Glycine max, Tamarino e Tritium vulgaris) e duas foram adquiridas no comércio (Canavalia ensiformis e Phytohemagglutinin P). No teste de aglutinaçäo direta com essas lectinas, foram observados variados agrupamentos quanto ao número e variedade de sítios receptores na superfície das leshmania, tendo as cepas do complexo brasiliensis apresentado maior número de sítios ligantes para as lectinas do que as do complexo mexicano e aquelas isoladas de pacientes no laboratório Gaspar Viana BARBOSA, W. et al, 1976, 1982,1984). Confirmamos através da reaçäo de imunofluorescência direta que as Lens culinaris e Canavalia ensiformis marcadas para nós com isotiocianato de fluoresceína (CLARK & SHEPARD), apresentaram resultados similares aos verificados com o teste de aglutinaçäo direta. Paralelamente testamos a capacidade das 12 lectinas aglutinarem Tripanossoma cruzi. Constatamos que a superfície do Tripanossoma apresenta mais epitopos ligantes para as lectinas do que a superfície de leishmanias. Acreditamos que a interaçäo lectinas com epítopos situados na superfície da membrana plasmática possibilita a caracterizaçäo de constituintes da superfície celular, o que tem contribuído para a caracterizaçäo de espécie celular


Subject(s)
Leishmania braziliensis , Leishmania mexicana , Culture Media , Lectins , Agglutination Tests , Trypanosoma cruzi , Cell Membrane , Epitopes , Fluorescent Antibody Technique
4.
Rev. patol. trop ; 13(1): 9-24, jan.-abr. 1984. tab
Article in Portuguese | LILACS | ID: lil-162802

ABSTRACT

Novo meio, inicialmente denominado, BHYMI (Brain-heart-yeast-meat infusion) logo Rq., constante basicamente de extrato de cérebro, extrado de coraçäo, estrato de carne, extrato de levedura, mais glicose, cloreto de sódio e água, é meio monofásico de baixo custo, disponível no comércio ou facilmente preparado com matérias primas locais, no laboratório, de fácil esterilizaçäo, claro, facilitando a coleta e contagem dos organismos cultivados; foi usado, inicialmente, como a fase líquida dos meios difásicos NNN ou Ducrey, logo como meio de cultura único (exclusivo) para cultivo de leishmanias. É capaz de isolar primariamente leishmania de lesöes, em proporçäo bastante razoáveis, manter cepas isoladas e de funcionar mesmo após ser guardado por 12 meses à temperatura ambiente, como líquido ou por mais tempo quando liofilizado. Seu pH ótimo é de 7.4 a 7.6. Quando enriquecido com soro fetal bovino (S.F.B) na proporçäo de 5, 10, 20 e/ou 30 pôr cento potencia o crescimento das cepas de leishmanias e permite o cultivo de Trypanossomas sp; usado em temperatura mais elevada condiciona o aparecimento de formas amastigotas dos tripanosomatídeos. Quando associado a soro de pato e/ou na presença de cloridrato de tetraciclina estimula a metaciclogenese do Trypanosoma cruzi. Associado ao sangue (Plasma e/ou soro) de galinha estimula a transformaçäo de promastigota de leishmania sp para amastigota em temperatura adequada (35º C). Enriquecido com carväo de sangue de feto bovino, de bovino adulto e de pato ("Charcoal" - sangue dissecado pelo calor lento e permanente, desidratado ou näo, previamente, a vácuo, e moído finamente, para se transformar em pó) - permite o crescimento exuberante de Trypanosomatídeos e mantém os atributos que soros e plasmas frescos ou conservados conferem ao meio, sendo muito bom para manutençäo e crescimento de Trypanosoma cruzi. Este meio pode ser usado como difásico sendo incorporado à peptona ou ágar, como base, tendo como meio líquido o próprio meio, soros consevados de boi, SFB ou soro de pato, meio 199, meio de Grace ou suplemento líquido de Hanks, dependendo da finalidade do cultivo. A associaçäo de extrato de flebotomíneos ou de triatomíneos ao meio permitiu também crescimento aumentado das leishmanias


Subject(s)
Biology , Trypanosomatina/growth & development , Culture Media , Leishmania/isolation & purification , Leishmania/growth & development , Trypanosoma cruzi/growth & development , Leishmania donovani/isolation & purification , Leishmania donovani/growth & development , Leishmania mexicana/isolation & purification , Leishmania mexicana/growth & development , Triatominae/growth & development , Leishmaniasis, Diffuse Cutaneous/etiology , Agar , Antigens
5.
Rev. patol. trop ; 13(1): 25-8, jan.-abr. 1984. ilus
Article in Portuguese | LILACS | ID: lil-162803

ABSTRACT

Os autores descrevem 3 casos de Leishmaniose cutâneo-mucosa, espundia, ocasionado um deles, por Leishmania mexicana amazonensis, cepa Maria - (BARRAL, A. & Cols. An. J. Trop. Med. Hyg.,32(2): 277-285, 1983) e os outros dois, por Leishmania de espécie näo enquadrável em nenhum dos complexos conhecidos, descrita pela primeira vez, por um de nós - W.B. & Cols. - como Leishmania MT (BARBOSA, W. & Cols. Ann. Trop. Med. Parasite, 70:389-399, 1976) e de que recentemente foram isoladas mais 7 (sete) cepas identificadas através de estudo clínico e biológico, inclusive enzimático do zimodema e esquisodema com 6 e 3 enzimas repectivamente; além da tipagem com anticorpos monoclonais que as determinaram como diferentes de quaissquer das Leishmanias conhecidas


Subject(s)
Humans , Male , Adult , Leishmania mexicana/isolation & purification , Leishmaniasis, Mucocutaneous/etiology , Leishmaniasis/therapy , Alanine Transaminase , Drug Therapy , Glucose Dehydrogenases , Leishmania/isolation & purification , Malate Dehydrogenase , Antibodies , Mice, Inbred BALB C , Immunoenzyme Techniques
6.
Rev. patol. trop ; 12(2): 155-63, maio-ago. 1983. tab
Article in Portuguese | LILACS | ID: lil-162813

ABSTRACT

Em 250 tentativas de isolamento primário de T. cruzi, de pacientes crônicos, foram realizados 04 (quatro) experimentos distintos, de que participaram respectivamente, 100, 100, 30 e 20 pacientes. Nos 03 (três) primeiros experimentos o sangue por hemocultura foi colhido com heparina na proporçäo de 1 gota/5 ml (5000u/5ml). Todos os casos foram cultivados em meio LIT, 130 o foram também em meio 199 mais soro fetal bovino a 30 pôr cento (SFB 30 pôr cento) e no meio anterior suplementado com extrato total de barbeiro (T. infestans). Todos estes 230 casos foram incubados por 60 dias e 26ºC e examinados de 15/15 dias. No último experimento a hemocultura também foi realizada em meio LIT, mas o sangue foi colhido com E.D.T.A. em todos os 20 casos: 10 destes foram lavados antes de inoculados, os outros 10 näo foram lavados. A incubaçäo foi feita a 26 ºC e foi mantida por tempo igual ou superior a 90 dias. Os resultados dos exames foram negativos nos primeiros 230 casos dos 03 (três) primeiros experimentos e foram positivos em 02 (dois) dos 10 casos lavados e em 06 (seis) dos näo lavados, colhidos em E.D.T.A. da última experiência. A heparina mostrou-se um agente bloqueador importante para o isolamento do T. cruzi, constituindo-se em conjunto com período de tempo de observaçäo do cultivo como os mais importantes fatores para o sucesso ou insucesso do isolamento. Os experimentos realizados com cepas de T. cruzi, previamente isolados mostraram que os trypanosomas podem crescer e alguns se mantêem vivos, por períodos täo longos quanto 40 dias em presença de soro imune específico ou näo imune, mas com complemento em proporçöes täo altas quanto 20 pôr cento, todavia näo ultrapassam os 40 dias em cultura na presença de heparina em concentraçöes iguais à usada para coleta de sangue


Subject(s)
Trypanosoma cruzi/isolation & purification , In Vitro Techniques , Heparin , Culture Media , Antibodies
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